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人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的凍存事項(xiàng)
日期：2025-01-25 18:19
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摘要：
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞在進(jìn)行血管內(nèi)皮細(xì)胞實(shí)驗(yàn)時(shí)，通常選用的細(xì)胞模型為人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（Human umbilical vein endothelial cells，簡(jiǎn)稱HUVECs)。而不是直接采用靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞或動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞。原因是臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞具有干細(xì)胞的潛能，理論上可以傳代50-60次。
調(diào)整細(xì)胞數(shù)2-5×10個(gè)/ml，按含細(xì)胞的RPMI-1640液ml數(shù)，配制等量的凍存液。凍存液中FBS占80%，DMSO占20%。例：含細(xì)胞的RPMI-1640液為8ml，應(yīng)配凍存液8ml，其中FBS為6.4ml,DMSO為1.6ml，混勻。置細(xì)胞懸液于冰浴中，逐滴加入凍存液，邊加邊搖動(dòng)。加完后用吸管吹打混勻。于冰浴中分裝細(xì)胞于凍存管中，1.8ml/管，再將凍存管置于凍存盒內(nèi)置-80℃冰箱，24小時(shí)后轉(zhuǎn)入液氮中保存。
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