產(chǎn)品詳情
pc-12(未分化)細(xì)胞
- 產(chǎn)品名稱：pc-12(未分化)細(xì)胞
- 產(chǎn)品型號：pc-12(未分化)
- 產(chǎn)品廠商：乾思中心
- 產(chǎn)品文檔：
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簡單介紹
pc-12(未分化)細(xì)胞
pc-12(未分化)細(xì)胞
的詳細(xì)介紹大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(未分化)
(PC-12M未分化)
細(xì)胞介紹
該細(xì)胞系來自能移植的雄性大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤。這些細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)生長因子
(NGF)受體。NGF可誘導(dǎo)產(chǎn)生神經(jīng)表型。細(xì)胞不合成腎上腺素。
細(xì)胞特性
1)來源：大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤
2)形態(tài)：多角形
3)含量：>lxl06 個/mL
4)污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格：T25瓶或者lmL凍存管包裝
運(yùn)輸和保存：使用含有上等胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細(xì)胞。收到細(xì)胞后，
可在1000RPM，常溫條件下，離心5min后，于潔凈操作臺棄去上清，加入推薦
使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至l〇cm培養(yǎng)皿或者T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，傳代達(dá)到細(xì)胞生長
狀態(tài)良好時，再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
細(xì)胞用途：僅供科研使用。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1. 準(zhǔn)備 F12K 培養(yǎng)基(F12K: SIGMA,貨號 N3520，添加 NaHC03 2.5g八)，80%;熱
滅活馬血清，15%;上等胎牛血清，5%，添加1%PS。
2. 培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%;二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。
3. 凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
2)細(xì)胞處理：
復(fù)蘇細(xì)胞：將含有l(wèi)mL細(xì)胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍，加
入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)
加l-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)?
細(xì)胞懸液加入l〇cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。**天換液并檢
查細(xì)胞密度。
細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
力口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37°C培
養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部
分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分
鐘，棄去上清液，補(bǔ)加l-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
將細(xì)胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者
瓶中。
細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄
去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約lml含血清的培養(yǎng)基后
加入凍存管中，再添加1〇%DMSO后進(jìn)行凍存。
注意事項(xiàng)：
收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立
即與我們聯(lián)系。
所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物**臺內(nèi)操作，并請注
意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。